為了探討性激素在良性前列腺增生中的作用,我們觀察了不同濃度的雌二醇(E2) 和雙氫睪酮(DHT) 對性激素結(jié)合球蛋白(SHBG) 預(yù)處理的前列腺xibao釋放環(huán)一磷酸腺苷(cAMP) 的影響,報告如下。

　　材料與方法　前列腺組織標本取自本院經(jīng)膀胱前列腺摘除手術(shù)病例。xibao原代培養(yǎng):將新鮮前列腺組織修剪后,酶消化過夜。翌晨收集xibao懸浮于含10 %FBS 的無酚紅RPMI-21640 培養(yǎng)液中培養(yǎng)2d 。前列腺上皮、間質(zhì)xibao培養(yǎng)[1] :將消化的前列腺xibao洗滌后,不連續(xù)Percoll 分離液梯度離心,分離出前列腺上皮xibao、間質(zhì)xibao,分別接種于改良的WAJC-2404 和無酚紅RPMI-21640 培養(yǎng)液中培養(yǎng),實驗時取第1 次傳代xibao。

　　調(diào)整xibao濃度為5 ×107/ ml , 按組分別接種24 孔板(0. 4 ml/ 孔) 繼續(xù)培養(yǎng)18 h 。

　　原代培養(yǎng)的增生性前列腺xibao分為4 組: (1) E2 組; (2) DHT 組;(3) SHBG+ E2 組; (4) SHBG+ DHT 組。第3 、4 組預(yù)先給予40 nmol/ L SHB G 孵育3 h, 然后加入終濃度為0 、1 、10 、50 、100 nmol/ L 的E2 、DHT , 作用15 min ( n = 6) 。第1 、2 組作為對照。傳代培養(yǎng)的前列腺上皮xibao、間質(zhì)xibao同樣用SHBG 處理,再加入上述濃度E2 作用15 min ( n = 6) 。

　　采用放免方法檢測xibao內(nèi)cAMP 含量。統(tǒng)計學(xué)處理用SPSS 軟件行方差分析。

　　結(jié)果　第3 組胞內(nèi)cAMP 產(chǎn)量較對照組明顯升高,分別為1. 88 ±0. 23 、3. 21 ±0. 21 、4. 75 ±0. 16 、6. 72 ±0. 23 、5. 92 ±0. 33 pmol/ 孔,差別有明顯性意義( P < 0. 01) 。其他各組cAMP 產(chǎn)量均無明顯變化。

　　在同一濃度條件下,間質(zhì)xibao內(nèi)的cAMP 值(3. 15 ±0. 16 pmol/ 孔) 比上皮xibao內(nèi)的cAMP 值(2. 07 ±0. 14 pmol/ 孔) 明顯升高,差別有明顯性意義( P <0. 01) 。

　　討論　雌、雄激素通過間質(zhì)2上皮相互作用刺激前列腺xibao生長與BPH 發(fā)生的關(guān)系備受關(guān)注。雌激素對體外培養(yǎng)的人前列腺間質(zhì)xibao有直接生長刺激作用,并能導(dǎo)致上皮xibao鱗狀化生[2] ,但機理尚未闡明。

　　本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn),前列腺培養(yǎng)xibao預(yù)先用SHBG 孵育后,再加入不同濃度的E2 ,xibao內(nèi)cAMP 產(chǎn)量較對照組明顯升高,而加入DHT 無此變化。同時,E2 在相同濃度時,間質(zhì)xibao內(nèi)cAMP 值比上皮xibao的明顯升高。提示E2 可能通過SHBG 介導(dǎo)而激活前列腺xibao內(nèi)第二信使系統(tǒng),導(dǎo)致胞內(nèi)cAMP 成倍增加,并且間質(zhì)xibao對雌激素的刺激更為敏感。第二信使cAMP 是xibao內(nèi)的信息,在xibao活化、增殖及凋亡過程中有十分重要的作用。在SHBG 介導(dǎo)下,雌激素激活第二信使cAMP 可能通過下述機制導(dǎo)致前列腺增生: (1) 促進雄激素受體 (AR) 、雌激素受體(ER) 上調(diào)[3] ,增加雄激素、雌激素的作用位點。

　　(2) 誘導(dǎo)前列腺特異抗原(PSA) 及某些肽類生長因子合成[4] 。第二信使活化后,能激活間質(zhì)、上皮xibao內(nèi)不依賴配體的雄激素受體(ligand2independent AR) ,導(dǎo)致AR 介導(dǎo)的轉(zhuǎn)錄增強,促進間質(zhì)xibao產(chǎn)生胰島素樣生長因子( IGF) 、角化生長因子( KGF) ,上皮xibao產(chǎn)生PSA 及表皮生長因子(EGF) 、轉(zhuǎn)化生長因子( TGF) 等,從而通過間質(zhì)2上皮相互作用刺激前列腺增生,這可能是雌激素參與BPH 發(fā)生的作用途徑之一